Exosome production, isolation and characterization from A549 Epithelial Carcinoma cells
Yükleniyor...
Tarih
2019
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Exosomes are natural nanoparticles that their special features as a natural, homogeneous, nanosized, targeted vesicles (~ 50- 100 nm) have started to be used in the treatment of cancer very recently They have high avidity (many conformational attachment) to attach onto targeted cancer cell surfaces. They are composed of bioactive double-layered lipid layers in which their original nature has the adhesive proteins interacting with the cancer cell membrane easily. In this study, the exosomes of non-small cell lung cancer, A549-epithelial carcinoma cells were investigated for their potential to be the natural or synthetic drug carrier. Firstly, exosomes of A549 cell line were produced using exosome-free media. Immediately after, isolation of their exosomes were performed by using ultracentrifugation procedure. Their SEM image, particle size and zeta potential measurements, exosomal RNA analysis and Protein Content by Bradford assays were performed. Findings (Size: 168 nm; zeta: -16mV) on the properties of A549 cell exosomes proved their potential to be used as the drug carrier for cancer cell therapy.
Ekzosomlar, kanser tedavisinde doğal, homojen, nano boyutlu, hedeflenmiş veziküller (~ 50 ila 100 nm) olarak özel özelliklerin son yıllarda kullanılmaya başlandığı doğal nanopartiküllerdir. Hedeflenen kanser hücresi yüzeylerine bağlanmak için yüksek bir aviditeye (birçok konformasyonel tutunmaya) sahiptirler. Özgün doğasında kanser hücresi membranı ile kolaylıkla etkileşebilen yapışkan proteinlere sahip olan biyoaktif çift-katmanlı lipit tabakalarından oluşurlar. Bu çalışmada, küçük hücreli olmayan A549 epitelyal kanser hücrelerinin ekzosomlarının doğal ya da sentetik ilaç taşıyıcı olabilme potansiyelleri araştırıldı. Öncelikle, ekzosom içermeyen ortamlarda üretilen A549 hücre dizisinin ekzosomları üretildi. Hemen sonrasında, ekzosomlarının izolasyonu ultrasantrifüj prosedürü kullanılarak yapıldı. SEM görüntü, partikül boyutu ve zeta potansiyel ölçümleri, exosomal RNA analizleri ve Bradford yöntemi ile protein içeriği analizi gerçekleştirildi. A549 hücrelerinin exozomlarının özelliklerine ilişkin bulgular (Boyut: 168 nm; zeta: -16mV), kanser hücresi terapisi için ilaç taşıyıcı olarak kullanılma potansiyellerini kanıtlamıştır.
Ekzosomlar, kanser tedavisinde doğal, homojen, nano boyutlu, hedeflenmiş veziküller (~ 50 ila 100 nm) olarak özel özelliklerin son yıllarda kullanılmaya başlandığı doğal nanopartiküllerdir. Hedeflenen kanser hücresi yüzeylerine bağlanmak için yüksek bir aviditeye (birçok konformasyonel tutunmaya) sahiptirler. Özgün doğasında kanser hücresi membranı ile kolaylıkla etkileşebilen yapışkan proteinlere sahip olan biyoaktif çift-katmanlı lipit tabakalarından oluşurlar. Bu çalışmada, küçük hücreli olmayan A549 epitelyal kanser hücrelerinin ekzosomlarının doğal ya da sentetik ilaç taşıyıcı olabilme potansiyelleri araştırıldı. Öncelikle, ekzosom içermeyen ortamlarda üretilen A549 hücre dizisinin ekzosomları üretildi. Hemen sonrasında, ekzosomlarının izolasyonu ultrasantrifüj prosedürü kullanılarak yapıldı. SEM görüntü, partikül boyutu ve zeta potansiyel ölçümleri, exosomal RNA analizleri ve Bradford yöntemi ile protein içeriği analizi gerçekleştirildi. A549 hücrelerinin exozomlarının özelliklerine ilişkin bulgular (Boyut: 168 nm; zeta: -16mV), kanser hücresi terapisi için ilaç taşıyıcı olarak kullanılma potansiyellerini kanıtlamıştır.
Açıklama
Anahtar Kelimeler
Exosome, Ultracentrifugation, A549 Cell Line, MiRNA, Ekzosom, Ultrasantrifüj, A549 Hücre Hattı
Kaynak
Hacettepe Journal of Biology and Chemistry
WoS Q Değeri
Scopus Q Değeri
Cilt
47
Sayı
4
