An Ideal Sperm Selection Method for the Intrauterine Insemination Treatment of Normozoospermic Infertile Patients
Küçük Resim Yok
Tarih
2020
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Aim: In this study, we evaluated the DNA integrity of sperms selected by using the conventional swim-up and density gradient centrifugation techniques and the new nanotechnology-based microfluidic chip method in order to determine the ideal sperm selection method for the intrauterine insemination treatment of normozoospermic infertile patients (NIPs). Materials and Methods: Semen samples obtained from 20 patients were divided into four equal fractions. Control, density gradient centrifugation, swim-up, and microfluidic chip (MC) groups were created, and the untreated (control) and treated (other) sperm samples from the four groups were examined for DNA integrity. Acidic aniline blue staining and the TUNEL method were used respectively for evaluating sperm chromatin condensation defects and DNA fragmentation. Dichlorofluorescein diacetate and flow cytometry were used to determine the reactive oxygen species levels. Results: We measured significantly lower values of chromatin condensation defects, DNA fragmentation and reactive oxygen species for the sperms selected with the MC method, compared to the sperms selected with the conventional methods (p<0.0001). Discussion and Conclusion: We found that the new MC method was more effective in selecting sperms with high DNA integrity, compared to the conventional methods. Accordingly, the MC method can be an ideal sperm selection method for use in the intrauterine insemination treatment of NIPs with high DNA fragmentation, apoptosis, and reactive oxygen species levels.
Amaç: Bu çalışmada normozoospermik infertil hastaların (NİH) intrauterin inseminasyon tedavisi için ideal sperm seçim yöntemini belirlemek amacıyla geleneksel yüzdürme ve yoğunluk gradyanlı santrifüjleme teknikleri ve yeni nanoteknoloji bazlı mikroakışkan çip yöntemi ile seçilen spermlerin DNA bütünlüğü değerlendirilmiştir. Gereç ve Yöntemler: Yirmi hastadan toplanan semen örnekleri dört eşit parçaya bölündü. Kontrol, yoğunluk gradyanlı santrifüjleme, yüzdürme ve mikroakışkan çip (MÇ) grupları oluşturuldu ve bu dört gruba ait işlem görmemiş (kontrol) ve görmüş (diğer) sperm örnekleri DNA bütünlüğü açısından incelendi. Sperm kromatin yoğunlaşma kusurlarını ve DNA kırıklarını değerlendirmek için asidik anilin mavisi ve TUNEL boyaması kullanıldı. Reaktif oksijen türevi seviyelerini tespit etmek için akış sitometrisi ile diklorofloresan diasetat kullanıldı. Bulgular: MÇ yöntemiyle seçilen spermlerde kromatin kondensasyon defekti, DNA fragmantasyonu ve reaktif oksijen türevi değerleri, geleneksel yöntemlerle seçilen spermlere göre anlamlı şekilde düşük bulundu (p<0,0001). Tartışma ve Sonuç: Yeni MÇ yönteminin geleneksel yöntemlere göre yüksek DNA bütünlüğüne sahip sperm seçiminde daha etkili olduğu görüldü. Buna göre MÇ yöntemi yüksek DNA kırığı, apopitoz ve reaktif oksijen türevi görülen NİH’lerin intrauterin inseminasyon tedavisinde ideal bir sperm seçim yöntemi olabilir.
Amaç: Bu çalışmada normozoospermik infertil hastaların (NİH) intrauterin inseminasyon tedavisi için ideal sperm seçim yöntemini belirlemek amacıyla geleneksel yüzdürme ve yoğunluk gradyanlı santrifüjleme teknikleri ve yeni nanoteknoloji bazlı mikroakışkan çip yöntemi ile seçilen spermlerin DNA bütünlüğü değerlendirilmiştir. Gereç ve Yöntemler: Yirmi hastadan toplanan semen örnekleri dört eşit parçaya bölündü. Kontrol, yoğunluk gradyanlı santrifüjleme, yüzdürme ve mikroakışkan çip (MÇ) grupları oluşturuldu ve bu dört gruba ait işlem görmemiş (kontrol) ve görmüş (diğer) sperm örnekleri DNA bütünlüğü açısından incelendi. Sperm kromatin yoğunlaşma kusurlarını ve DNA kırıklarını değerlendirmek için asidik anilin mavisi ve TUNEL boyaması kullanıldı. Reaktif oksijen türevi seviyelerini tespit etmek için akış sitometrisi ile diklorofloresan diasetat kullanıldı. Bulgular: MÇ yöntemiyle seçilen spermlerde kromatin kondensasyon defekti, DNA fragmantasyonu ve reaktif oksijen türevi değerleri, geleneksel yöntemlerle seçilen spermlere göre anlamlı şekilde düşük bulundu (p<0,0001). Tartışma ve Sonuç: Yeni MÇ yönteminin geleneksel yöntemlere göre yüksek DNA bütünlüğüne sahip sperm seçiminde daha etkili olduğu görüldü. Buna göre MÇ yöntemi yüksek DNA kırığı, apopitoz ve reaktif oksijen türevi görülen NİH’lerin intrauterin inseminasyon tedavisinde ideal bir sperm seçim yöntemi olabilir.
Açıklama
Anahtar Kelimeler
[No Keywords]
Kaynak
ANADOLU KLİNİĞİ TIP BİLİMLERİ DERGİSİ
WoS Q Değeri
Scopus Q Değeri
Cilt
25
Sayı
1
